2024 m. laboratorinio tyrimo santrauka. Ataskaitą parengė doc. dr. Renata Žvirdauskienė, Kauno technologijos universiteto Cheminės technologijos fakultetas. Dokumente nurodyti 2024 metai; tiksli tyrimo diena nepateikta. Straipsnio paskelbimo data nėra tyrimo atlikimo data.
Tirti 7 koncentratų mėginiai: avižų, ryžių, apelsinų (lentelėje – apelsinų–mangų), aviečių, aronijų, medaus–imbiero–laimo ir rugių. Vertinta 16 bakterijų padermių bei 2 mikroskopinių grybų reakcija.
Bakterijoms taikytas difuzijos į agarą įdubų metodas, grybams – dvigubos kultūros metodas, lyginant augimą su kontrole.
Tyrimo išvados:
Tyrimo ribos. Tai laboratorinis antimikrobinių savybių tyrimas. Rezultatai apibūdina tirtus mėginius ir bandymo sąlygas; jie neįrodo gydomojo poveikio žmogui. Vien augimo slopinimo zona neleidžia viso rezultato priskirti tik gyvoms bakterijoms ar daryti išvados apie produkto klinikinį veiksmingumą.
Rezultatai. Ataskaitos 2 lentelėje pateiktos skirtingo dydžio augimo slopinimo zonos 15 bakterijų padermių; Helicobacter pylori visų mėginių rezultatas – 0 mm. 3 lentelėje pateikti abiejų grybų augimo slopinimo koeficientai. Rezultatai priklauso nuo mėginio ir mikroorganizmo.
Tyrimas nenustato vartojimo dozės ir nepatvirtina visų dabar parduodamų skonių poveikio.
Skaityti originalią 2024 m. tyrimo ataskaitą (PDF). Praktinė informacija – BIFIDO DUK.
Detalesnį tyrimo procesą pateikiame čia 
Tyrimai atlikti su 7 rūšių fermentuotais gėrimais:
1 – avižų Bifido fermentuotas probiotinis gėrimo koncentratas;
2 – ryžių Bifido fermentuotas probiotinis gėrimo koncentratas;
3 – apelsinų Bifido fermentuotas probiotinis gėrimo koncentratas;
4 – aviečių Bifido fermentuotas probiotinis gėrimo koncentratas;
5 – aronijų Bifido fermentuotas probiotinis gėrimo koncentratas;
6 – medaus imbiero-laimo Bifido fermentuotas probiotinis gėrimo koncentratas;
7 – rugių Bifido fermentuotas probiotinis gėrimo koncentratas.
Tirtas BIFIDO fermentuotose probiotinių gėrimų koncentratuose esančių gerųjų bakterijų
antimikrobinis poveikis prieš 18 mikroorganizmų (16 bakterijų ir 2 mikroskopinius grybus):
- Micrococcus luteus ATCC 9341
- Bacillus cereus ATCC 11778
- Klebsiela pneumoniae ATCC 700603
- Enterobacter cloacae ATCC 23355
- Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
- Bacillus subtilis subsp. spizizenii ATCC 6633
- Salmonella cholerasuis ATCC 10708
- Citrobacter freundii ATCC 43864
- Esherichia coli DSM 19683
- Salmonella agona ATCC 700720
- Listeria monocytogenes ATCC 13932
- Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145
- Staphylococcus aureus ATCC 25923
- Hafnia alvei ATCC 13337
- Salmonella typhimurium ATCC 14028.
- Helicobacter pylori DSM 105471
- Acremonium sp. (LAMMC kolekcija)
- Fusarium graminearum (LAMMC kolekcija)
Difuzijos į agarą (įdubų) metodas
Nustatant jautrių bakterijų kultūrų jautrumą tiriamiesiems BIFIDO fermentuotiems probiotinių gėrimų koncentratams difuzijos į agarą (įdubų) metodu, jautrių bakterijų kultūrų suspensija (1×106 KSV/ml) pilama į ištirpintą ir atvėsintą iki 47 °C temperatūros terpę bendram mikroorganizmų skaičiui nustatyti (PCA – Plate count agar (Liofilchem, Italija)) – į 100 ml terpės pilamas 1 ml sporų suspensijos. Terpės su jautrių bakterijų kultūrų mišinys išpilstomas į 3 90 mm skersmens Petri lėkšteles po 12-15 ml. Terpei leidžiama sustingti ant horizontalaus paviršiaus. Po to specialiu prietaisu agare išpjaunamos apvalios 8 mm skersmens įdubos (kiekvienoje Petri lėkštelėje po 3 įdubas). Į kiekvieną padarytą įdubą sulašinama po 50 μl tiriamojo fermentuoto gėrimo. Lėkštelės inkubuojamos 24 h 37,0±0,5 °C temperatūroje ir tada vertinami rezultatai.
Bakterijos auga lėkštelėje, o aplink įdubą susidaro jautrios bakterijų kultūros augimo slopinimo zonos, aiškiai matomos išaugusių bakterijų kolonijų fone. Iš skaidrios zonos dydžio sprendžiama apie bakterijų jautrumą atitinkamam tiriamam gėrimui. Augimo slopinimo zonos plotis matuojamas liniuote arba slankmačiu. Matuojamos slopinimo zonos skersmuo turi eiti per įdubos centrą. Kiekviena įduba, aplinkui kurią susidarė skaidri bakterijų augimo slopinimo zona matuojama dviem statmenomis kryptimis (vienoje lėkštelėje gauname 6 rezultatus).
Pamatavus visą skersmenį bei žinant duobutės skersmenį, slopinimo zonos plotis
apskaičiuojamas pagal formulę:
Iš skaidrios zonos dydžio sprendžiama apie bakterijų jautrumą atitinkamam tiriamam tirpalui. Augimo slopinimo zonos plotis matuojamas liniuote arba slankmačiu. Matuojamos slopinimo zonos skersmuo turi eiti per centrą. Pamatavus visą skersmenį bei žinant filtrinio popieriaus disko skersmenį, slopinimo zonos plotis apskaičiuojamas pagal formulę:
Yra tam tikra priklausomybė tarp slopinimo zonos pločio ir bakterijų jautrumo, pagal kurią
vertinami gauti rezultatai.
Dvigubos kultūros metodas
Metodo esmė yra ta, kad vienoje Petri lėkštelėje centre ant terpės paviršiaus yra sėjamas mikroskopinis grybas (2 pav. A) ir 2,5 cm atstumu nuo jo dedamas filtrinio popieriaus diskas (6 mm skersmens) (Hahnemuhle, Vokietija), sumirkytas tiriamojo BIFIDO fermentuoto probiotinių gėrimų koncentrato mėginyje (2 pav. B). Tyrimui naudota PDA Potato Dextrose Agar (Liofilchem, Italija) terpė, skirta mielių ir mikroskopinių grybų auginimui. Paruošta terpė išpilstoma į Petri lėkšteles po 12 ml, sustingus terpei kiekvieno mikroskoponio grybo miceliniai diskai (10 mm skersmens), paimti iš septynias paras augintų F. graminearum ir Acremonium sp. izoliatų kultūrų krašto, dedami miceliu žemyn į kiekvienos Petri lėkštelės su išpilstyta terpe centrą dviem pakartojimais. Kaip kontrolė, naudotos Petri lėkštelės, kuriose ant terpės auga tik tiriamasis mikroskopinis grybas. Lėkštelės inkubuojamos 25,0±0,5 C temperatūroje 7 paras arba iki kol kontrolinėje lėkštelėje mikroskopinis grybas užauga iki pat lėkštelės krašto.
Slopinimo koeficientas (SK) apskaičiuojamas pagal formulę:
Tyrimo rezultatai
Rezultatus vertinkite pagal originalios ataskaitos 2 ir 3 lenteles bei konkrečias bandymo sąlygas. Augimo slopinimas laboratorijoje nėra įrodymas, kad vartojamas produktas naikina šiuos mikroorganizmus žmogaus organizme.
Duomenų neatitikimas. Ataskaitos tekste didžiausias Acremonium sp. slopinimas priskiriamas rugių mėginiui, tačiau 3 lentelėje didžiausia reikšmė nurodyta aviečių mėginiui. Šiam neatitikimui išspręsti reikalingas tyrėjos paaiškinimas; bendro teiginio apie „stipriausią“ koncentratą neteikiame.
